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MSP甲基化檢測

簡要描述:MSP甲基化檢測:甲基化特異性PCR(Methylation-Specific PCR,MSP)是一種用于檢測DNA甲基化狀態(tài)的高靈敏度技術(shù)。其基本原理是利用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,使未甲基化的胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)化為niao嘧啶(U),而甲基化的胞嘧啶保持不變。隨后,設(shè)計(jì)針對(duì)甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過瓊脂糖凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物,從而確定DNA序列的甲基化狀態(tài)。

  • 更新時(shí)間:2025-02-21
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    甲基化特異性PCR(Methylation-Specific PCR,MSP)是一種用于檢測DNA甲基化狀態(tài)的高靈敏度技術(shù)。其基本原理是利用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,使未甲基化的胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)化為niao嘧啶(U),而甲基化的胞嘧啶保持不變。隨后,設(shè)計(jì)針對(duì)甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過瓊脂糖凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物,從而確定DNA序列的甲基化狀態(tài)。以下是MSP甲基化檢測的詳細(xì)步驟和注意事項(xiàng):

    MSP的基本原理是用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,未甲基化的胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)化為niao嘧啶(U),而甲基化的胞嘧啶(5mC)保持不變。隨后,設(shè)計(jì)兩對(duì)特異性引物,分別針對(duì)甲基化和非甲基化序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增。如果用針對(duì)甲基化DNA鏈的引物能擴(kuò)增出片段,則說明該位點(diǎn)存在甲基化;反之,說明該位點(diǎn)不存在甲基化。

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